PCR實(shí)驗(yàn)，即臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)，是專(zhuān)門(mén)用來(lái)檢驗(yàn)艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一種檢測(cè)手段。它可以通過(guò)將病毒體內(nèi)所含的基因進(jìn)行擴(kuò)增的方法，測(cè)出一些病毒含量不高的感染者體內(nèi)是否含有特定的病毒。就新冠病毒核酸檢測(cè)來(lái)，RT-PCR是目前使用最廣泛和較準(zhǔn)確的篩選和確認(rèn)方法。

實(shí)驗(yàn)室的平面布局、空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)、氣流控制等都是圍繞同一個(gè)核心問(wèn)題進(jìn)行——“避免污染”，任何級(jí)別的醫(yī)院在建設(shè)PCR實(shí)驗(yàn)室時(shí)，均需要提前考量各個(gè)因素，以保證標(biāo)本的全環(huán)節(jié)質(zhì)量及實(shí)驗(yàn)室的生物安全。  

1.樣本間交叉感染：收集樣本的容器被污染或樣本密封不嚴(yán)導(dǎo)致外溢；不同樣本移液時(shí)忘記更換槍尖或未使用帶濾芯槍尖；移液器等實(shí)驗(yàn)器具及耗材未及時(shí)消毒滅菌；不同樣本同時(shí)開(kāi)蓋或樣本劇烈震蕩、反復(fù)吹吸導(dǎo)致氣溶膠形成擴(kuò)散，相互交叉污染。 

 2.實(shí)驗(yàn)試劑污染：主要是在 PCR 組分試劑加樣過(guò)程中，由于移液器、容器、陰性對(duì)照及其它試劑被核酸模板或陽(yáng)性對(duì)照污染。加樣過(guò)程中，因?yàn)镻CR試劑對(duì)溫度十分敏感，需要通過(guò)冰浴使得PCR試劑和PCR板/管處于0℃，但這個(gè)過(guò)程也充滿污染風(fēng)險(xiǎn)。

 3.擴(kuò)增產(chǎn)物污染：大量拷貝的產(chǎn)物泄漏或擴(kuò)增后的PCR反應(yīng)管意外開(kāi)蓋，這是PCR反應(yīng)中最主要、最常見(jiàn)的污染問(wèn)題。因?yàn)镻CR產(chǎn)物拷貝量大，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于PCR檢測(cè)數(shù)個(gè)拷貝的極限，所以極微量的PCR產(chǎn)物污染，就可形成假陽(yáng)性。

 4.克隆質(zhì)粒污染：作為陽(yáng)性質(zhì)控品的克隆質(zhì)粒外溢。  

1.正確佩戴手套：手套未緊密貼合拇指、食指和中指，在進(jìn)行開(kāi)蓋操作時(shí)容易發(fā)生交叉污染。 

2.正確使用生物安全柜：簡(jiǎn)單、整潔、避免通風(fēng)口堵塞；操作前后紫外線照射，消毒劑隨手可及；廢液缸里有1/3體積的含氯消毒液，并且及時(shí)清理廢液缸，保證廢物不超過(guò)廢液缸體積的2/3。  

3.核酸提取儀去污染：每天多批次檢測(cè)時(shí)，在每一批次檢測(cè)完以后必須用75%的乙醇和核酸去除劑對(duì)儀器進(jìn)行去污染。

4.重視通風(fēng)：不定期對(duì)房間進(jìn)行通風(fēng)，每次至少持續(xù)30min。

5.PCR擴(kuò)增區(qū)去污染：PCR反應(yīng)管必須蓋緊，避免擴(kuò)增后的核酸對(duì)環(huán)境的污染。

6.實(shí)驗(yàn)室隨手可及的消毒劑。

1.每日工作前后，對(duì)工作區(qū)域表面、地面進(jìn)行清潔并消毒，使用含氯消毒液擦拭。清潔采用濕式、不揚(yáng)塵的方式進(jìn)行。

2.物品防塵存放。墻面定期清潔，有可見(jiàn)污染及時(shí)進(jìn)行清潔消毒。

3.配備移動(dòng)紫外線消毒裝置進(jìn)行空氣和物表的消毒。 

 4.生物安全柜的消毒：

 a.每天工作前：對(duì)生物安全柜的內(nèi)表面進(jìn)行消毒，包括工作臺(tái)面和內(nèi)壁使用消毒劑擦拭。

 b.工作結(jié)束：柜內(nèi)物品全部消毒后移出。消毒劑擦拭臺(tái)面四周、以及玻璃內(nèi)側(cè)燈部位。 

 c.消毒劑應(yīng)選擇能夠殺死生物安全柜里可能發(fā)生的任何微生物（70%乙醇、含氯消毒劑）。在使用漂白劑等腐蝕性消毒劑后，還應(yīng)用無(wú)菌水再次進(jìn)行擦拭。

 d.停用生物安全柜前，運(yùn)行5min以凈化內(nèi)部空氣。

 e.終末消毒：需要進(jìn)行終末消毒的時(shí)機(jī)：生物安全。